枸骨葉為冬青科植物枸骨的干燥葉,始載于唐代陳藏器所著《本草拾遺》,曰:“此木肌白,如狗之骨。”李時珍在《本草綱目》中收載,曰:“微苦,涼,無毒。浸酒,補腰腳令健。”“燒灰淋汁或煎膏,涂白癜風。”又曰:“葉有五刺,如貓之形,故名。”鑒別枸骨葉時,可通過性狀鑒別、顯微鑒別及薄層色譜法對其進行鑒別。
1.性狀鑒別
枸骨葉呈類長方形或矩圓狀長方形,偶有長卵圓形,長3~8cm,寬1.5~4cm。先端具3枚較大的硬刺齒,頂端1枚常反曲,基部平截或寬楔形,兩側有時各具刺齒1~3枚,邊緣稍反卷;長卵圓形葉常無刺齒。上表面黃綠色或綠褐色,有光澤,下表面灰黃色或灰綠色。葉脈羽狀,葉柄較短。革質,硬而厚。氣微,味微苦。
2.顯微鑒別
枸骨葉葉片近基部橫切面:上表皮細胞類方形,壁厚,外被厚的角質層,主脈處有單細胞非腺毛;下表皮細胞略小,可見氣孔。柵欄組織為2~4列細胞,海綿組織疏松;主脈處上、下表皮內為1至數列厚角細胞。主脈維管束外韌型,其上、下方均具木化纖維群。葉緣表皮內常依次為厚角細胞和石細胞半環帶,再內為木化纖維群;葉緣近葉柄處僅有數列厚角細胞,近基部以上漸無厚角組織。葉緣表皮內和主脈處下表皮內厚角組織中偶有石細胞,韌皮部下方的纖維群外亦偶見。薄壁組織和下表皮細胞常含草酸鈣簇晶。
3.薄層色譜法鑒別
取枸骨葉粉末2g,加70%乙醇40ml,超聲處理30分鐘,濾過,濾液蒸干,殘渣加水40ml使溶解,加三氯甲烷40ml振搖提取,棄去三氯甲烷液,水層加濃氨試液2ml,搖勻,再加水飽和的正丁醇40ml振搖提取,分取正丁醇液,濃縮至干,殘渣加甲醇2ml使溶解,作為供試品溶液。另取枸骨葉對照藥材2g,同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗,吸取上述兩種溶液各1μl,分別點于同一硅膠G薄層板上,以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:3:1:0.3)為展開劑,展開,取出,晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。